细胞一般长到什么时候就可以分瓶
来源:网友推荐 更新:2025-05-16
什么时候用细胞培养瓶什么时候用细胞培养
1.原代培养(Primary Culture)期:
也称初代培养,即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的(Heterogeneous),也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养时,细胞克隆形成率(Cloning Efficiency)很低,即细胞独立生存性差。克隆形成率即细胞群被稀释分散成单个细胞进行培养时,形成细胞小群(克隆)的百分数。初代培养细胞多呈二倍体核型;由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大,是检测物很好的实验对象。
2.传代期:
初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系(Diploid Cell Line)。为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10~50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止,细胞进入第三期。
3.衰退期:
此期细胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;细胞形态轮廓增强,最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段,少数情况下,在以上三期任何一点(多发生在传代末或衰退期),由于某种因素的影响,细胞可能发生自发转化(Spontaneous Transformation)。转化的标志之一是细胞可能获得永生性(Immortality)或恶性性(Malignancy)。细胞永生性也称不死性,即细胞获持久性增殖能力,这样的细胞群体称无限细胞系(Infinite Cell Line),也称连续细胞系(Continuous Cell Line)。在早期文献中无限细胞系也称已建立细胞系(Established Cell Line),现已不用。无限细胞系的形成主要发生在第二期末,或第三期初阶段。细胞获不死性后,核型大多变成异倍体(Heteroploid)。细胞转化亦可用人工方法诱发,转化后的细胞也可能具有恶性性质。细胞永生性和恶性性非同一性状。
南县丝芙:细胞一般长到什么时候就可以分瓶
姓澜18922387759: 也称初代培养,即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的(Heterogeneous),也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞...
南县丝芙:细胞传代培养常见问题合集!
姓澜18922387759: 收到细胞应先不开启,使用酒精消毒细胞瓶外壁,静置培养箱数小时后,在倒置显微镜下观察细胞生长情况,对细胞进行拍照,并检查培养基的颜色和是否漏液。02 更换培养基的时机视细胞密度而定,常规细胞一般每2-3天更换一次。03 细胞生长至完全汇合后应进行传代,避免生长过密,接触抑制的细胞则在密度70-8...
南县丝芙:华陀多年行医,发现药瓶中有一种细菌生长很快:例如在瓶中放一个细菌...
姓澜18922387759: 不对,分裂59分钟后还差最开始的那个一个瓶子才会满,因此还得要要分裂一次,所以还是要一个小时
南县丝芙:一个细胞一秒钟分裂一次,装满一杯要100秒,装满杯子的一半要多少秒?_百 ...
姓澜18922387759: 59分钟可以分裂满瓶子
南县丝芙:贴壁细胞经胰蛋白酶消化后,分瓶继续培养就是传代培养,其细胞核型不变...
姓澜18922387759: 在传代培养中,细胞在前10代内通常保持其正常的生长和增殖状态,因此这一阶段的细胞被称为传代培养细胞。然而,随着传代次数的增加,细胞的生长状态可能会发生变化。大多数细胞在传代超过10代后,生长速度会逐渐减缓,最终大部分细胞将停止生长。但仍然有一部分细胞可以继续生长到大约50代左右,这被称为细胞...
南县丝芙:SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)培养建议-杭州昊鑫生物
姓澜18922387759: 1. 以成团簇形式生长。2. 三维团簇生长,复苏和传代后会重新附着为三维岛屿,最终扩散成单层。3. 生长缓慢,细胞70%至80%汇合度时进行分瓶处理,传代频率为每周2至3次,血清浓度20%有利于促进生长。4. 漂浮细胞为正常现象,3天后继续粘附贴壁。5. 接种密度为8.0×104至1.5×105活细胞\/cm2启动...
南县丝芙:细胞培养|实验室常用实验技术--细胞培养--基础篇
姓澜18922387759: 关键设备:生物安全柜:提供无菌操作环境。培养箱:提供适宜的温度、湿度和气体环境,促进细胞生长。其他设备:水浴锅:预热培养基和PBS等液体。低速离心机:收集细胞。冰箱:保存培养基、药物等试剂。倒置显微镜:观察细胞生长状态。耗材:细胞培养瓶:用于细胞培养。细胞冻存管和离心管:用于收集和分装细胞。...
南县丝芙:成纤维细胞原代培养
姓澜18922387759: 组织块法则需等待2-3天到1周,细胞在皮肤组织块周围生长并融合,最终铺满培养容器底壁。常用胰蛋白酶将细胞消化后分瓶传代培养。体外条件下,成纤维细胞保持良好的分裂增殖能力,细胞形态变化明显,生命期限与物种和个体年龄相关。人胚细胞约可培养50代,恒河猴皮肤细胞超过40代,鸡胚细胞仅少数能培养30代...
南县丝芙:原代细胞培养和传代培养的方法及其:细胞培养和传代
姓澜18922387759: 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时 也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。 材料和试剂 1. 细胞:贴壁细胞株 2. 试剂:0.25%...
南县丝芙:求助Hela细胞培养
姓澜18922387759: Hela细胞生长速度较快,通常2天左右就可以进行一次传代。我一般采取1:3的比例传代,最多间隔3天进行一次传代。当细胞生长至瓶壁覆盖度达到100%时,就需要进行传代了。这个过程需要你仔细观察细胞生长情况,以便及时进行传代操作。需要注意的是,Hela细胞生长过程中可能会遇到一些问题,如细胞聚集、生长速度...
原代细胞培养专家齐氏生物认为,细胞培养器材常用的有培养瓶(T12.5\25\35\75\150)、培养板(6、12、24、48、96孔板) 。
一般讲细胞的类型分为:贴壁型和悬浮型。这两种细胞均可用培养板,培养瓶来培养。
总结:一般常规原代细胞培养,传代培养可用培养瓶培养,目的为获得大量试验用细胞,而培养板则用于试验,如药敏试验、MTT(96孔培养板),免疫组化(6孔培养板)等等。
希望能帮到您!
不同细胞可能长满细胞数是不同的,对于同一种细胞,你可以计数几次,以后就可以大致知道有多少。但是一般做实验种细胞的时候都会计数,虽然不是很准确,这是个精度的问题,但是它保证了基本每次的都在一个数量级,不至于相差太离谱。
正常细胞培养时,不论细胞的种类和供体的年龄如何,在细胞全生存过程中,大致都经历以下三个阶段:1.原代培养(Primary Culture)期:
也称初代培养,即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的(Heterogeneous),也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养时,细胞克隆形成率(Cloning Efficiency)很低,即细胞独立生存性差。克隆形成率即细胞群被稀释分散成单个细胞进行培养时,形成细胞小群(克隆)的百分数。初代培养细胞多呈二倍体核型;由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大,是检测物很好的实验对象。
2.传代期:
初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下,细胞增殖旺盛,并能维持二倍体核型,呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系(Diploid Cell Line)。为保持二倍体细胞性质,细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。如不冻存,则需反复传代以维持细胞的适宜密度,以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10~50次左右,细胞增殖逐渐缓慢,以至完全停止,细胞进入第三期。
3.衰退期:
此期细胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;细胞形态轮廓增强,最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段,少数情况下,在以上三期任何一点(多发生在传代末或衰退期),由于某种因素的影响,细胞可能发生自发转化(Spontaneous Transformation)。转化的标志之一是细胞可能获得永生性(Immortality)或恶性性(Malignancy)。细胞永生性也称不死性,即细胞获持久性增殖能力,这样的细胞群体称无限细胞系(Infinite Cell Line),也称连续细胞系(Continuous Cell Line)。在早期文献中无限细胞系也称已建立细胞系(Established Cell Line),现已不用。无限细胞系的形成主要发生在第二期末,或第三期初阶段。细胞获不死性后,核型大多变成异倍体(Heteroploid)。细胞转化亦可用人工方法诱发,转化后的细胞也可能具有恶性性质。细胞永生性和恶性性非同一性状。
姓澜18922387759: 也称初代培养,即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的(Heterogeneous),也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞...
姓澜18922387759: 收到细胞应先不开启,使用酒精消毒细胞瓶外壁,静置培养箱数小时后,在倒置显微镜下观察细胞生长情况,对细胞进行拍照,并检查培养基的颜色和是否漏液。02 更换培养基的时机视细胞密度而定,常规细胞一般每2-3天更换一次。03 细胞生长至完全汇合后应进行传代,避免生长过密,接触抑制的细胞则在密度70-8...
姓澜18922387759: 不对,分裂59分钟后还差最开始的那个一个瓶子才会满,因此还得要要分裂一次,所以还是要一个小时
姓澜18922387759: 59分钟可以分裂满瓶子
姓澜18922387759: 在传代培养中,细胞在前10代内通常保持其正常的生长和增殖状态,因此这一阶段的细胞被称为传代培养细胞。然而,随着传代次数的增加,细胞的生长状态可能会发生变化。大多数细胞在传代超过10代后,生长速度会逐渐减缓,最终大部分细胞将停止生长。但仍然有一部分细胞可以继续生长到大约50代左右,这被称为细胞...
姓澜18922387759: 1. 以成团簇形式生长。2. 三维团簇生长,复苏和传代后会重新附着为三维岛屿,最终扩散成单层。3. 生长缓慢,细胞70%至80%汇合度时进行分瓶处理,传代频率为每周2至3次,血清浓度20%有利于促进生长。4. 漂浮细胞为正常现象,3天后继续粘附贴壁。5. 接种密度为8.0×104至1.5×105活细胞\/cm2启动...
姓澜18922387759: 关键设备:生物安全柜:提供无菌操作环境。培养箱:提供适宜的温度、湿度和气体环境,促进细胞生长。其他设备:水浴锅:预热培养基和PBS等液体。低速离心机:收集细胞。冰箱:保存培养基、药物等试剂。倒置显微镜:观察细胞生长状态。耗材:细胞培养瓶:用于细胞培养。细胞冻存管和离心管:用于收集和分装细胞。...
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姓澜18922387759: 细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时 也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。 材料和试剂 1. 细胞:贴壁细胞株 2. 试剂:0.25%...
姓澜18922387759: Hela细胞生长速度较快,通常2天左右就可以进行一次传代。我一般采取1:3的比例传代,最多间隔3天进行一次传代。当细胞生长至瓶壁覆盖度达到100%时,就需要进行传代了。这个过程需要你仔细观察细胞生长情况,以便及时进行传代操作。需要注意的是,Hela细胞生长过程中可能会遇到一些问题,如细胞聚集、生长速度...